Analyse de Lipides, Sucres et autres Carbohydrates en biologie humaine

l’HPTLC est la solution pour l’empreinte lipidique ou saccharidique d’un fluide biologique, ou le dosage de traceurs spécifiques.

L’HPTLC est très versatile et permet d’étudier aussi bien la peau humaine que les maladies métaboliques. Cela se fait avec un budget limité, et en donnant une réponse rapide sur des paramètres spécifiques. Elle peut également être performante grâce à la révélation immunologique et au couplage avec la spectrométrie de masse.

Mots clés

#Phospholipides #céramides #gangliosides #oligosaccharides urinaires #Maladies métaboliques #lipides de peau #peaux atopiques

Que pouvons nous faire pour vous ?

Pour tous les échantillons, en première intention, ou comme méthode finale, la quantification simple et rapide. Le choix des détections de sucres et lipides (plus de 20 pour le cholestérol) donne une grande sélectivité, et permet de réaliser des dosages dans des matrices biologiques humaines, animales ou végétales en limitant les interférences. Méthode de référence pour les phospholipides, les céramides, les oligosaccharides mais pas seulement.

Comment y arriver ?


Méthode

Le choix de la bonne détection en révélation par immersion dans le réactif approprié est la clé du succès de votre analyse. Si le nombre de pics est important le gradient de séparation AMD2 devient indispensable. Nous pouvons louer des systèmes d’analyse adaptés aux résultats attendus, ou proposer des essais de courte durée afin de faire la preuve du concept et une étude de faisabilité.

BF: before treatment;
AF: after treatment;
CER-NS: Ceramide2 (normal sphingosine);
CER-NP: Ceramides 3 (normal phytosphingosine);
CER-AS: Ceramide5 (α hydroxy sphingosine);
 
CER-A: covalently bound ceramides Cer (OS) sphingosine-w-hydroxy F.A;
CER-B: covalently bound ceramides Cer (OH)
6hydroxy sphingosine-ω-hydroxy F.A.
 
Iuliana POPA Club CCM Octobre 2010


Automatisme

L’automatisme des opérations est modulaire et s’adapte à chaque contexte. Le dépôt automatisé permet de travailler en analytique ou pour la préparation de témoins. L’AMD2 est indispensable pour toute séparation complexe. La méthodologie est primordiale, l’automatisme des procédures les rend parfaitement robustes.


Bénéfices

Une méthode HPTLC automatique est jusqu’à plus de 1000 fois plus sensible qu’un système CCM manuel. L’instrumentation est la garantie de résultats quantitatifs grâce à la qualité du dépôt de la séparation et de la détection. Le couplage MS, en particulier Maldi aide à la caractérisation des inconnus.

Ressources


Bibliographie

http://www.camag.com/en/tlc_hptlc/camag_laboratory/publications/own_publications.cfm

La Cumulative Camag Bibliographie Service est une base de données en ligne permettant d'avoir accés aux références et résumés de l'essentiel de la bibliographie publiée sur un sujet donné grâce à une recherche par mots clés.

Le journal CBS, disponible en ligne ou en version papier, est gratuit. Les éditions précédentes sont également accessibles en cliquant ici.


Notes d'application

Consulter les notes d'application


En savoir plus

Vous pouvez pour en savoir plus vous rendre sur le site www.clubdeccm.com, et accéder ainsi aux précédentes conférences sur le sujet qui vous intéresse. Vous pouvez également adhérer.
Ateliers Lipides et sucres du Club de CCM
Gerli conférences HPTLC et site web cyberlipids
Le site du Symposium donne accés aux anciens évènements et à leur contenu.
http://www.hptlc.com/old/

la CCM c’est vieux l’HPTLC c’est jeune

Vous aimez les belles couleurs ?!

HPTLC pour la légèreté

Un bilan vraiment à 100% sans HPTLC c’est bidon

Mini plaque mini prix mais elle fait le maximum

Au milieu de tous ces pics séparés, lesquels vous intéressent vraiment ?

Quoi de neuf ? L’HPTLC-AMD-EDA-MS-RMN

Vous avez séparé 10 millions de pics ? Vous êtes prêt pour le burn-out

Que faire avec 1mL de solvant et une HPTLC ? 60 analyses

Avez-vous seulement essayé avant de critiquer ?

En Chromato Liquide c’est le T qui change tout

Vous êtes pressés? faites de l’HPTLC

La détection sur HPTLC c’est un couteau Suisse

Tu t’y connais toi en HPTLC ? Nous oui.

Lâchez la pression !

Et la synthèse sur plaque ? ...

Vous ne savez pas quoi faire ? Faites de l’HPTLC

La sélectivité de l’HPTLC c’est la révélation

Soyez visionnaire, faites de l’HPTLC !

Vous n’êtes pas plombier(e) faites de l’HPTLC

Ne jetez pas vos échantillons dans l’environnement

La synthèse d’un produit pur c’est bien ! Contrôlé par HPTLC c’est mieux

Pas de perte de temps en rinçage ni équilibrage de colonne

Réfléchissez avant d’agir, l’HPTLC va vous y aider

Tout sur plaque rien dans la colonne c’est de la magie

Une plaque ça ne se bouche pas

Un labo sans HPTLC est appelé à disparaître

l’UPLC vous prend la tête ? Faites de l’HPTLC

L’orthogonalité n’est pas une vue de l’esprit

Les miettes sous le tapis (dans la colonne) c’est pas notre truc

Vous êtes satisfait d’un dosage d’impureté avec seulement une UPLC-MS : vous avez le goût du risque

60 échantillons en parallèle ça avance

Cultivez votre silice sur plaque

L’HPTLC c’est fiable

Ce soir dodo tranquille: je n’ai plus rien en route

Fini l’âpre préparation d’échantillons (la plaque n’est pas réutilisée)

Vous êtes incrédule ? Ces plaques sont pour vous

La précision à 0,1% vous l’avez !... mais plus ou moins combien ?

Ne soyez pas esclave de votre passeur d’échantillon

Donnez-vous le temps de l’HPTLC

Ressources méthodes générales

Bibliographie

USP : General Chapter « High-Performance Thin-Layer Chromatography procedure for identification of articles of botanical origin » General Chapter « Identification of articles of botanical origin by High-Performance Thin-Layer Chromatography ». Voir aussi : Camag Laboratory

Formation

Environ 70 notes d’application sur les plantes médicinales ont été développées et sont accessibles sur le site Camag. Le site www.hptlc-association.org dispose également de plus de 200 méthodes d’analyse de plantes accessibles en ligne.

Pour en savoir plus

Vous pouvez pour en savoir plus vous rendre sur le site www.clubdeccm.com, et accéder ainsi aux précédentes conférences sur le sujet qui vous intéresse. Vous pouvez également adhérer. Le site du Symposium donne accès aux anciens évènements en particulier celui de Bâle, présidé par le prof. Matthias Hamburger et dont une large session avait été consacrée aux extraits botaniques, et en particulier aux plantes médicinales dans les différentes pharmacopées. http://www.hptlc.com/old/programs_basel.html